Steady state kinetics and inhibition studies of α- amylase from Soybean (Glycine max)

Abstract

सोयािीन के अंकुररि िीजों का उपयोग α-एमाइलेज़ तनकालने के तलए तकया जािा था, एक स्टार्ा हाइडरोलाइतजंग एंजाइम जो ग्लूकोज और माल्टोज़ जैसे कम आणतवक-वजन वाले उत्पादों में आंिररक α-1,4-ग्लाइकोतसतडक िांड के हाइडरोतलतसस को उत्प्रेररि करिा है। जि पीएर् 6 था और िापमान 60 तडग्री सेण्वियस था िो पृथक एंजाइम सिसे अतधक सतक्रय था। तनकाले गए α-एमाइलेज़ की अवतिष्ट गतितवतध को समान प्रायोतगक ण्वितियों के िहि मापा गया और 50 तदनों के िाद 37 तडग्री सेण्वियस पर 23.04% और 4 तडग्री सेण्वियस पर 51.3% पाया गया। तवतिन्न सब्सट्रेट् सांद्रिा पर उत्पन्न उत्पाद की मात्रा को सब्सट्रेट् एकाग्रिा के प्रिाव की जांर् करने के तलए प्रयोग के तहस्से के रूप में मापा गया था। α-एमाइलेज़ के Vmax की गणना लाइनवीवर िका प्लॉट् का उपयोग करके की गई थी। पीएर् 5.5 पर 50 एमएम सोतडयम एसीट्ेट् िफर में स्टार्ा के तलए स्पष्ट माइकतलस ण्विरांक (तकमी (ऐप)) 72.9 μmoles/min था। अवरोधक के रूप में कई पौधों के अका की प्रिाविीलिा पर एक अध्ययन िी तकया गया था। इन तवट्रो प्रयोगों के दौरान पौधों के अका ने सोयािीन अल्फा-एमाइलेज को िातधि तकया है। जितक, इन-तसतलको जांर् के दौरान हमने पाया तक जो यौतगक पहले से ही पिकेम डेट्ािेस पर उपलब्ध थे, उन्ोंने हमारे 3डी जेनरेट्ेड मॉडल के साथ अवरोध तदखाया। इसके अलावा, BLAST पररणाम का तवश्लेषण करने से हमने पाया तक ग्लाइसीन मैक्स से α- एमाइलेज़ CBM20 डोमेन-युक्त पररवार से संिंतधि है जो स्टार्ा र्यापर्य में एक तनयामक िूतमका तनिािा है, और इसमें दो स्टार्ा िाइंतडंग साइट्ें िातमल हैं। जैव प्रौद्योतगकी उपयोगों के साथ अनुकूलिा के कारण अनाज α-एमाइलेज अतधक महत्वपूणा हो गए हैं। सोयािीन अपनी व्यापक उपलब्धिा और सरल िुण्विकरण प्रतक्रया के कारण पौधे α-एमाइलेज़ के तलए एक वांछनीय प्रतििापन हो सकिा है। कई औद्योतगक अनुप्रयोगों के तलए, इसका उपयोग α-एमाइलेज़ के आतथाक रूप से व्यवहाया स्रोि के रूप में तकया जा सकिा है।